齐鲁干细胞公司的研发团队关于工业化工艺制备的低氧MSC产品的生物学功能及其对大鼠糖尿病伤口愈合的治疗作用的研究项目,荣获由济南市科学技术协会、济南市发展和改革委员会、济南市科学技术局、济南市工业和信息化局以及济南市人民政府国有资产监督管理委员会联合颁发的优秀科技创新项目奖项。研究结果已发表于《Biomedical
and Environmental
Sciences》。
该研究使用的低氧MSC,由冻存的工作库常氧MSC经复苏后,在1% O?浓度下培养96h制备而成。经过细胞形态、数量、细胞活性、细胞生长曲线检测、表面标志物检测、细胞周期检测、划痕实验检测等,低氧MSC各生物学功能指标均符合MSC产品国际质量标准,可用于临床前研究。在糖尿病难愈合伤口动物实验中设置了对照组、常氧MSC组及低氧MSC组。
低氧MSC生物学功能检测
在伤口手术后第1天和第9天将溶媒或800μL(1×107/ mL)细胞皮下注射到糖尿病大鼠背部伤口,并在D0,D3,D6,D9,D12和D15检查伤口愈合情况。
结果显示,伤口面积随时间逐步缩小,在第9天时,对照组、常氧组和低氧组的平均伤口面积分别为1.97cm2、2.09cm2和1.31cm2,低氧组与对照组具有明显差异(P<0.01),第15天时低氧MSC组伤口愈合率达92.29%。伤口组织病理学评分结果表明,低氧组表皮再生平均得分为0.6,对照组和常氧MSC组得分为0.0,低氧MSC组在表皮再生能力方面显著优于对照组(P <0.05)。
低氧MSC组除了在伤口愈合中的优秀表现,血管内皮生长因子(VEGF)呈现出高表达状态,与常氧MSC相比,低氧MSC在48h时VEGF表达量显著增加,约为常氧MSC的20倍,同时,高水平的VEGF对表皮再生功能的改善也与研究中的组织病理学表皮再生结果互相验证。此外,研究还通过与外周血单核细胞(PBMC)共培养,检测了低氧MSC的免疫调节能力。结果显示,低氧MSC组Th1和Th17下调,而Th2和Treg上调,但与常氧MSC组差异并不显著。因此,基于以前的报道与研究结果,低氧MSC中VEGF分泌量的提高可能是促进大鼠糖尿病伤口愈合的原因。
常氧MSC与低氧MSC中细胞因子的分泌
(信息来源:山东省齐鲁干细胞工程有限公司)